氯霉素检测方法有哪些?

1、微生物测定方法

微生物法是根据氯霉素是属于抗生素来设定的实验方法，原理是如果检测的样品中如有抗生素的残留则会对实验中培养的细菌产生抑制其生长的作用形成抑菌圈，根据有无抑菌圈以及抑菌圈的大小来判定检测结果微生物法可以根据检测的抗生素的种类不同来培养不同的细菌。

目前微生物测定法主要有棉签法、杯碟法、纸片法、TTC法、戴尔沃检测法、蓝黄检测法(BY法)、发光细菌法等。

2、免疫分析法

免疫分析法是以抗原与抗体特异性结合反应为基础的分析技术。自1975年Milstein和Kohler在体外用B淋巴细胞杂交瘤技术制备出均一性的单克隆抗体以来，免疫标记技术便得到广泛的应用。

通过查阅的资料知道免疫分析法有以下的几种：酶联免疫法(ELISA)也就是本次毕业设计所使用的方法，酶免疫标记技术是用酶标记的抗体与样品中相应的抗原反应，然后与酶底物作用，形成有色沉淀物，进而进行观察测定的技术。

分为之间酶联免疫分析和间接酶联免疫分析，沈建忠等人用化学发光ELISA检测了肌肉中氯霉素的残留量，回收率在97-118%范围内。酶联免疫法操作简便，检验快速，现象明显但出现假阳性的现象。

其他的免疫分析法还有：放射免疫分析(RIA)、常用来检测小分子农兽药的痕量残留的免疫荧光分析法(FIA)、胶体金免疫层析(GICA)胶体金免疫层析检测时间短，可以在较短的时间内看到实验结果，无需设备，胶体金试纸条是一次性使用的，无需清洗避免了上一个样品对下一次检测的干扰。

3、仪器分析法

仪器分析法是一种对设备要求较高的检方法，检测成本相对于微生物法和免疫分析法要高，但仪器分析法的准确性以及更大，常见的仪器分析法有：高效液相色谱法(HPLC)，HPLC是20世纪70年代发展起来的一项高效、快速的分离分析技术，是残留检测中的常用方法。

氯霉素检测的注意事项

1、室温低于20℃或试剂及样品没有回到室温(20～25℃)会导致所有标准的OD值偏低。

2、在洗板过程中如果出现板孔干燥的情况，则会出现标准曲线不成线性，重复性不好的现象。所以洗板拍干后应立即进行下一步操作。

3、每加一种试剂前需将其摇匀。

4、反应终止液为2M硫酸，避免接触皮肤。

5、不要使用过了有效日期的试剂盒;也不要使用过了有效期的试剂盒中的任何试剂，掺杂使用过了有效期的试剂盒会引起灵敏度的降低;不要交换使用不同批号试剂盒中的试剂。

6、储存条件:保存试剂盒于2～8℃，不要冷冻，将不用的酶标板微孔板放进自封袋重新密封。标准物质和无色的发色剂对光敏感，因此要避免直接暴露在光线下。

7、试剂变质的迹象

发色试剂有任何颜色表明发色剂变质，应当弃之。0标准的吸光度(450/630nm)值小于0.5(A450nm<0.5)时，表示试剂可能变质。

8、在加入底物液A液和底物液B液后，一般显色时间为15～20min即可。若颜色较浅，可延长反应时间到30min(或更长)，但不得超过40min。反之，则减短反应时间。

9、该试剂盒最佳反应温度为25℃，温度过高或过低将导致检测吸光度值和灵敏度发生变化。